S01#
Avtor: Lana Bajec
Datum izdelave: 2024-05-26
Koda seminarja: S01
Vhodni podatek#
Povezava do datoteke z vhodnim podatkom: S01
Rezultati analiz#
Identifikacija proteina#
Poravnava nukleotidnega zaporedja plazmida pUC57 z dobljenim nukleotidni zaporedjem v blastn - del, ki se ne ujema, je zapis za iskan protein.
Poravnava dobljenega zaporedja samega s sabo v blastn in kopiranje zaporedja od 431 do 1955 (neznan protein)
Iskanje proteina z blastx - najboljše ujemnaje s holin sulfatazo.
Primerjanje zaporedja iskanega proteina z zaporedjem encima holin sulfataze (Nocardioidaceae bacterium) dobljenega v GenBank v blastn - dobljeno 94,07 % ujemanje. Na podlagi tega lahko sklepamo, da je to naš iskan protein.
Iskanje v UniProt#
ime proteina: holin sulfataza
izvorni organizem: Nocardioidaceae bacterium
lokalizacija: citoplazma
velikost proteina: 501 ak
domenska zgradba: sulfataza, N-končna domena; holin sulfataza, C-končna; sulfataza
funkcija proteina: encim, ki katalizira reakcijo pretvorbe holin-O-sulfata v holin.
###Post-translacijske modifikacije: pretvorba ak ostanka serina ali glicina v C-formilglicin, pomembno za katalitsko aktivnost
za moj protein v UniProt tega podatka ni bilo: poravnava s holin sulfatazo organizma Rhizobium meliloti (zanj ta podatek je naveden) v UniProt. Proteina imata enako aktivno mesto in spremenjen ak ostanek - FGly
Iskanje sorodnih proteinov:#
Ak zaporedje proteina damo v blatp
Zapordja dobljenih proteinov kopiramo v Clustal Omega - dobimo filogentsko drevo za holin sulfatazo v različnih organizmih
###Najbolj in najmanj ohranjene regije Zaporedja podobnih proteinov preverimo s Clustal Omega Opazimo, da je pri vseh proteinih ohranjena regija z aktivnim in vezavnim mestom. Najmanjšo podobnost imajo C in N končne regije - najmanj ohranjene.
###Podobni evkariontski proteini: Ak zaporedje proteina pregledamo z blastp, dodamo filter - organizem = evkariont
organizem: Patellaria atrata (gliva), protein: holin sulfataza, funkcija: hidrolaza
organizem: Coccidioides immitis (gliva), protein: holin sulfataza, funkcija: hidrolaza
organizem: Coccidioides posadasii gliva), protein: holin sulfataza, funkcija: hidrolaza
###Struktura proteina Struktura določena z AlphaFold3